Molekylär diagnos: vad det är och vad det är för

Den molekylära diagnosen motsvarar en uppsättning molekylära tekniker som syftar till att identifiera förändringar i DNA som kan vara indicativa för genetiska sjukdomar eller cancer, till exempel. Dessutom används molekylära tekniker i stor utsträckning för identifiering och bekräftelse av infektionssjukdomar, eftersom de representerar en snabbare och mer exakt diagnostisk metod.

Molekylär diagnos är dyr och därför inte särskilt ofta efterfrågad av läkare, men det ger exakta resultat om förändringens närvaro, hur det kan störa inverkan av organismen och patientens respons på sjukdomen. behandling.

Vad är det för

Molekylär diagnos kan utföras med flera mål, de viktigaste är:

• Identifiering av mutationer relaterade till leukemi, såsom identifiering av BCR-ABL-translokation, som är karakteristisk för kronisk myeloid leukemi (CML);
• Mutationer som är karakteristiska för hematologiska sjukdomar, såsom ärftlig hemokromatos, polycytemi vera, essentiell trombocytemi och trombofilias, till exempel - förstå vad som är trombofili och hur behandlingen är klar;
• Molekylära förändringar som indikerar förekomst av cancer, till exempel kolorektal, lung-, bröst- och hjärncancer, till exempel;
• Diagnos av infektionssjukdomar såsom hepatit, uretrit, toxoplasmos, leishmaniasis, etc., förutom att identifiera HPV-viruset .

Molekylär diagnos, trots att den anses vara dyr jämfört med andra diagnostiska tekniker, är mer exakt, eftersom den kan informera ändringen relaterad till en viss sjukdom och graden av inflytande av denna förändring i organismen och därigenom medhjälpa behandlingen av personen.

Förutom att användas för diagnos av olika sjukdomar används molekylära tekniker för att utvärdera svaret på behandlingen, särskilt hos personer med cancer, vara en av de mest effektiva metoderna för att indikera sjukdomsutveckling och återfall.

Hur det är gjort

Molekylär diagnos kan utföras med vilket prov som helst, och läkaren uppmanas att ge information om patientens tillstånd, vilket kan vara urin, saliv eller oftast blod. Det är inte nödvändigt att snabbt eller någon annan förberedelse för undersökningen.

Provet samlas in och skickas till laboratoriet tillsammans med läkarens råd och informerar den undersökning eller typ av forskning som ska göras. Den molekylära tekniken som utförs beror på den begärda undersökningen och innefattar en serie exakta förfaranden vars slutliga mål är att identifiera närvaron eller frånvaron av förändring som begärs av läkaren.

Vanligtvis används endast en liten mängd prov, resten lagras så att testet om nödvändigt upprepas.

Se vad är de viktigaste molekylära teknikerna

PCR

PCR, kort för polymeras kedjereaktion, är en molekylär teknik som består av att amplifiera ett fragment av det genetiska materialet, det vill säga DNA eller RNA, med målet att identifiera mutationer och därmed hjälpa till vid diagnos av sjukdomar.

Denna teknik framställs genom extraktion och rening av det genetiska materialet, vilket sedan placeras i en blandning i vilken en av komponenterna är ett restriktionsenzym som varierar enligt den begärda undersökningen och vars funktion är att skära materialet i fragment att identifiera en möjlig genetisk förändring. Blandningen placeras i en termocykler, vilken är en apparat som verkar genom temperaturvariationen som indikeras av den professionella enligt undersökningen och på så sätt tillåter amplifiering av det genetiska fragmentet. I fallet med konventionell PCR utsätts PCR-produkten efter amplifiering för elektrofores, vilken är en molekylär teknik baserad på vikten och storleken av fragmenten, dvs enligt dessa egenskaper bildas ett mönster av band, vars analys utförs baserat på bandet av den positiva kontrollen, det vill säga i bandet som är känt att motsvara den genetiska förändringen.

Realtids-PCR, även kallad qPCR, är en typ av kvantitativ PCR, det vill säga, förutom att identifiera den genetiska förändringen, kan den ge information om genuttrycket, det vill säga hur mycket den förändrade genen uttrycks i organismen, och kan därmed användas för att hjälpa diagnos och övervaka behandling. Realtids-PCR kräver ingen elektrofores, hela processen med förstärkning och analys av det genetiska materialet görs av en apparat och resultatet tolkas av en utbildad sjukvårdspersonal.

sekvensering

Sekvensering är en molekylär teknik som består av att bestämma DNA-nukleotidsekvensen. Sekvensering sker från en PCR-liknande reaktion, men i amplifieringsblandningen tillsätts nukleotider modifierade genom tillsats av fluorokrom, att när materialet amplifieras inkorporeras de modifierade nukleotiderna i DNA: n och genererar flera fragment, vilka motsvarar produkten från sekvenseringen.

Reaktionsprodukten placeras i en apparat som kallas en DNA-sekvenserare, vari fragmenten slås av apparatens laser, fluorkromerna exciteras, vilket emitterar fluorescens, vilken indikeras av apparaten med hjälp av toppar, varje motsvarande topp till en nukleotid. Vid slutet av reaktionen kommer utrustningen att informera DNA-sekvensen och därigenom hjälpa läkaren att diagnostisera genetiska sjukdomar.