Bakterioskopi är en diagnostisk teknik som gör det möjligt att snabbt och enkelt identifiera förekomst av infektioner, eftersom det med hjälp av specifika färgningstekniker är möjligt att visualisera bakteriestrukturerna i mikroskopet.
Detta test kan göras med något biologiskt material och läkaren måste ange det material som ska samlas in och analyseras, och resultatet indikerar huruvida förekomsten eller frånvaron av bakterier, liksom deras kvantitet och egenskaper har verifierats.
Vad är det för
Bakterioskopi är ett diagnostiskt test som kan göras med något biologiskt material och kan användas för att snabbt identifiera bakterieinfektioner:
- Sexuellt överförbara sjukdomar som gonorré och klamydia, till exempel används penis- eller vaginala sekretioner för detta ändamål. Samlingen görs genom användning av en steril vatpinne och det är kontraindicerat att genomföra genitalregionens hygien 2 timmar före undersökningen och inte ha sex under 24 timmar före insamlingen.
- Tonsillit, eftersom genom insamling av halssekretioner är det möjligt att identifiera gram-positiva bakterier som är ansvariga för inflammation i amygdala, med närvaro av streptokockbakterier;
- Infektioner i urinvägarna, vilket görs genom att analysera den första urinstrålen;
- Tuberkulos, där sputumet analyseras
- Infektioner i kirurgiska sår, eftersom det är vanligt att infektioner uppträder efter operation på grund av minskningen av immunförsvaret hos personen. Sålunda kan insamling av sårutsöndring med en steril swab indikeras för att verifiera den möjliga närvaron av bakterier i platsen;
- Hud- eller nagelskador, som består av uppsamling av ett ytligt prov, att inte använda krämer och emaljer minst 5 dagar före undersökningen. Även om bakterioskopi kan utföras, observeras svampar vanligen vid undersökning av nagelprovet.
Dessutom kan bakterioskopi användas för att diagnostisera bakteriell meningit, respiratoriska och gastrointestinala sjukdomar och kan utföras med biopsi eller analt material.
Således är bakterioskopi en laboratorieteknik som kan användas i klinisk praxis för att diagnostisera sjukdomar som orsakas av bakterier, vilket indikerar egenskaperna hos orsakssambandet hos sjukdomen och därmed låter läkaren starta behandlingen, även innan den identifieras i laboratoriet, vilket kan ta ca 1 vecka.
Hur är det gjort?
Bakterioskopiundersökningen görs i laboratoriet och det material som samlas in från patienten analyseras i mikroskopet för att undersöka frånvaron eller närvaron av bakterier utöver dess egenskaper.
Förberedelserna för examen beror på materialet som kommer att samlas in och analyseras. När det gäller vaginalt material rekommenderas inte kvinnan att hygienisera 2 timmar före undersökningen och inte ha samlag under de senaste 24 timmarna, medan det i fråga om insamling av nagel eller hudmaterial, till exempel, rekommenderas att inte passera emalj, krämer eller ämnen på huden före undersökning.
I fallet med ett prov av vaginalsekretion, till exempel, sippra som användes för att göra samlingen passerar i cirkulära rörelser på en slida, som måste identifieras med patientens initialer och sedan färgas med färgningen av gram. I fallet med ett sputumprov, till exempel vilket material som samlas in huvudsak för att verifiera närvaron av den bakterie som är ansvarig för tuberkulos, är färgningen som används i bakterioskopi den hos Ziehl-neelsen, vilken är mer specifik för denna typ av mikroorganism.
Normalt när närvaron av bakterier är verifierad utförs laboratoriet identifieringen av mikroorganismen och antibiogrammet, vilket ger ett mer fullständigt resultat.
Hur görs Gram stain?
Färgningen av gram är en enkel och snabb färgteknik som möjliggör differentiering av bakterier enligt deras egenskaper, vilket möjliggör differentiering av bakterier till positiva eller negativa beroende på färgning, vilket möjliggör deras visualisering under mikroskopet.
Denna färgning metod använder två huvudfärger, en blå och en rosa, som kan fläcka bakterierna eller inte. Bakterier färgade i blått sägs vara gram-positiva, medan de i rosa kallas gram-negativa. Från denna klassificering är det möjligt att läkaren startar förebyggande behandling, även före identifieringen av mikroorganismen.
Förstå hur Gram stain är gjord
Bakteriell identifiering med gramfärgning är snabb, praktisk och billig att göra och är väsentlig för läkare eftersom specifika egenskaper hos dessa grupper av bakterier är kända och läkaren kan indikera en förebyggande behandling baserad endast på färgning av gram.
Denna färgning har som princip differentieringen av bakterier enligt cellväggens egenskaper. Gram-positiva bakterier har mer än en tjock mur av peptidoglykan, som kan bibehålla den första färgbrunnen, medan gramnegativa bakterier har en tunnare vägg och kan lätt missfärgas vid exponering för alkohol.
Gramfärgning görs i fem huvudsteg, men protokollet kan variera beroende på laboratoriet:
- Täck bladet med violett kristallfärg och låt handla i ca 1 minut;
- Tvätta bladet med en rinnande rinnande vatten och täck bladet med lugol, som syftar till att fixa det blå färgämnet och låt handla i 1 minut. Båda typerna av bakterier kan absorbera det komplex som bildas av färgämne och lugol, blir blå.
- Tvätta sedan bladet med rinnande vatten och applicera 95% alkohol, låt det fungera i 30 sekunder. Alkohol är ansvarig för att lösa lipidmembranet som bildar de gramnegativa bakterierna och därigenom avlägsnar komplexet bildat mellan färgämnet och lugolen, missfärgning av dessa bakterier. I fallet med gram-positiva bakterier är alkohol emellertid utarmad av cellväggen av gram-positiva bakterier, vilket orsakar sammandragning av porerna och gör dem ogenomträngliga;
- Skölj sedan under rinnande vatten och täcka bladet med det andra färgämnet, fuchsin eller safranin och låt handla i 30 sekunder;
- Bladet ska sköljas med kranvatten och får torka vid rumstemperatur.
När bladet är torrt är det möjligt att placera en droppe nedsänkningsolja och observera bladet i mikroskopet med ett 100x objektiv. Det är möjligt att verifiera närvaron eller närvaron av bakterier, såväl som närvaron av jäst och epitelceller.
Vad betyder resultatet?
Syftet med bakterioskopi-resultatet är att indikera om det finns närvaro eller frånvaro av mikroorganismer, egenskaper och kvantitet, förutom det material som analyserades.
Resultatet är negativt när inga mikroorganismer observeras och positiva när mikroorganismer visualiseras. Resultatet anges vanligtvis i korsningar (+), där 1 + indikerar att 1 till 10 bakterier visualiserades i 100 fält och kan vara en indikation på en initial infektion, och 6 + representerar närvaron av mer än 1000 bakterier per observerat fält, vilket representerar en mer kronisk infektion eller bakteriell resistens, vilket exempelvis indikerar att behandlingen inte är effektiv.
Dessutom är färginformationen som har använts i rapporten känd, vilken kan vara Gram eller Ziehl-neelsen, till exempel, utöver egenskaperna hos mikroorganismen, som en form och ett arrangemang, antingen i kluster eller i kedjor, till exempel.
Normalt, när resultatet är positivt, identifierar laboratoriet mikroorganismen och antibiogrammet, vilket indikerar vilket antibiotikum som mest rekommenderas för att behandla infektion med en viss bakterie.
